Koolen was in 1997 investeerder in het in 1996 opgerichte [[Booking.com]] (toen bookings.nl)<ref>[http://www.quotenet.nl/Miljonairs/Kees-Koolen QuoteNet]</ref> en vervulde er de functie van CEO van 2001 tot 2011. Onder zijn leiding werd Booking.com in 2005 voor €110 miljoen verkocht aan Priceline. In 2017 gaf Koolen in een interview aan dat de verkoop geen goede beslissing was geweest voor de Nederlandse economie.<ref>[https://www.businessinsider.nl/het-verkopen-van-booking-com-aan-de-amerikanen-slecht-voor-nederland-geweest-stelt-de-oprichter/ Oprichter: Verkoop van Booking.com aan Amerikanen is slecht geweest voor Nederland] Business Insider, 11 mei 2017</ref>
In 2010 investeerde Koolen in het bedrijf 'Super B', een producent van Lithiumlithium-batterijen, en hij werd daar ook eigenaar van. Super B fuseerde in 2018 met [[Lithium Werks]],<ref>[https://www.sprout.nl/artikel/disruptie/4-vragen-aan-kees-koolen-die-net-een-rd-campus-voor-batterijen-heeft-aangekondigd Vier vragen aan Kees Koolen, die net een RD campus voor batterijen heeft aangekondigd] sprout.nl </ref> waarmee Koolen zich gaat richten op de elektrificatie van voertuigen door zware batterijen te produceren voor onder andere boten, treinen en heftrucks.<ref>[https://www.quotenet.nl/Nieuws/Quote-500-lid-Kees-Koolen-van-Booking.com-gaat-de-strijd-aan-met-Tesla-217567 Quote 500-lid Kees Koolen van Booking.com gaat de strijd aan met Tesla] Quotenet.nl, 14 september 2018</ref> Voor dit bedrijf haalde Koolen €1,6 miljard bij investeerders op voor de bouw van een batterijenfabriek in China.<ref>[https://www.reuters.com/article/us-lithium-werks-china-plant/dutch-battery-company-to-build-1-6-billion-euro-plant-in-china-idUSKCN1MQ1HG Dutch battery company to build 1.6 billion euro plant in China] Reuters, 16 oktober 2018</ref> De research-en-development-afdeling zou worden gevestigd in Nederland op de [[Technology Base Twente]].<ref>[https://dewerelddraaitdoor.bnnvara.nl/media/425573 interview DWDD] De wereld draait door bnnvara 16 oktober 2018</ref> Later bleek dit plan niet door te gaan.<ref>[https://www.rtlz.nl/business/artikel/4574391/batterijcampus-twente-lithium-werks] Twentse droom in duigen: investeerders zien locatie batterij-hub niet zitten </ref>
Sinds 2012 heeft Koolen ook een aantal persoonlijke investeringen gedaan. Zijn investeringen omvatten een totaal van $3M in [https://www.boaconsulta.com BoaConsulta] (augustus 2012, december 2013 en oktober 2017), $532K in Marerua Ltd (januari 2014), $4,5M in [[GetYourGuide]] (januari 2014 - hoofdinvesteerder), $100K in behaview (februari 2014), €1.2M en £1.2M in Cloakroom (mei 2014), [https://hardt.global Hardt Hyperloop] (oktober 2019 - hoofdinvesteerder) en recentelijk een investering van €4M in metazoekmachine voor vakantiehuizen [https://www.holidu.nl Holidu] als hoofdinvesteerder (september 2020).<ref>[https://www.crunchbase.com/person/kees-koolen ‘Kees Koolen Personal Investments’] Crunchbase, 21 September 2020</ref>
Ook nam Koolen deel aan de [[Dakar-rally]] in 2017, waarin hij op een quad een etappe won.<ref>{{Citeer web|url=https://rallymaniacs.com/dakar/dakar-2019/4763-quadrijder-kees-koolen-niet-meer-naar-dakar-rally.html|werk=Rally Maniacs|titel=Quadrijder Kees Koolen niet meer naar Dakar Rally}}</ref>
